www.chinacdoe.com ملاحظہ کرنے کا شکریہ۔آپ جس براؤزر کا ورژن استعمال کر رہے ہیں اسے محدود CSS سپورٹ حاصل ہے۔بہترین تجربے کے لیے، ہم تجویز کرتے ہیں کہ آپ ایک اپ ڈیٹ شدہ براؤزر استعمال کریں (یا انٹرنیٹ ایکسپلورر میں مطابقت موڈ کو غیر فعال کریں)۔اس دوران، مسلسل تعاون کو یقینی بنانے کے لیے، ہم سائٹ کو بغیر اسٹائل اور جاوا اسکرپٹ کے رینڈر کریں گے۔
سائٹ پر موجود صلاحیتوں کے ساتھ لیب آن اے چپ سسٹم تیز اور درست تشخیص کی صلاحیت پیش کرتے ہیں اور وسائل کی محدود ترتیبات میں مفید ہیں جہاں بایومیڈیکل آلات اور تربیت یافتہ پیشہ ور افراد دستیاب نہیں ہیں۔تاہم، ایک پوائنٹ آف کیئر ٹیسٹنگ سسٹم بنانا جس میں بیک وقت ملٹی فنکشنل ڈسپنسنگ، آن ڈیمانڈ ریلیز، قابل اعتماد کارکردگی، اور ریجنٹس کی طویل مدتی اسٹوریج کے لیے تمام ضروری خصوصیات موجود ہوں۔یہاں ہم ایک لیور ایکیویٹڈ مائیکرو ٹریول سوئچ ٹیکنالوجی کی وضاحت کرتے ہیں جو کسی بھی سمت میں سیالوں کو جوڑ سکتی ہے، لاگو ہوا کے دباؤ کو درست اور متناسب ردعمل فراہم کر سکتی ہے، اور اچانک حرکت اور کمپن کے خلاف مستحکم رہ سکتی ہے۔ٹیکنالوجی کی بنیاد پر، ہم پولیمریز چین ری ایکشن سسٹم کی ترقی کی بھی وضاحت کرتے ہیں جو ریجنٹ کے تعارف، اختلاط اور رد عمل کے افعال کو ایک ہی عمل میں مربوط کرتا ہے، جو 18 مریضوں کے تمام طبی ناک کے نمونوں کے لیے "نمونہ میں جواب آؤٹ" کارکردگی کو پورا کرتا ہے۔ انفلوئنزا اور 18 انفرادی کنٹرولز، معیاری پولیمریز چین ری ایکشن کے ساتھ فلوروسینس کی شدت کی اچھی موافقت میں (پیئرسن کوفیشینٹس> 0.9)۔ٹیکنالوجی کی بنیاد پر، ہم پولیمریز چین ری ایکشن سسٹم کی ترقی کی بھی وضاحت کرتے ہیں جو ری ایجنٹ کے تعارف، اختلاط اور رد عمل کے افعال کو ایک ہی عمل میں مربوط کرتا ہے، جو 18 مریضوں کے تمام طبی ناک کے نمونوں کے لیے "نمونہ میں جواب آؤٹ" کارکردگی کو پورا کرتا ہے۔ انفلوئنزا اور 18 انفرادی کنٹرولز کے ساتھ، معیاری پولیمریز چین ری ایکشن کے ساتھ فلوروسینس کی شدت کی اچھی موافقت میں (پیئرسن کوفیشینٹس> 0.9)۔Основываясь на этой технологии, мы также описываем разработку системы полимеразной цепной реакции, которая объединяет функции введения реагентов, смешивания и реакции в одном процессе, что обеспечивает выполнение «образец-в-ответ-выход» для всех клинических образцов из носа от 18 пациентов с Грипп и 18 отдельных контролей, в хорошем соответствии интенсивности флуоресценции со стандарткой полимеразной полимеразной полимеразной цепицыей на> 0،9)۔اس ٹکنالوجی کی بنیاد پر، ہم پولیمریز چین ری ایکشن سسٹم کی ترقی کی بھی وضاحت کرتے ہیں جو انجیکشن لگانے، مکس کرنے اور ایک ہی عمل میں رد عمل کے افعال کو یکجا کرتا ہے، جس سے 18 انفلوئنزا کے مریضوں کے تمام طبی ناک کے نمونوں کے لیے نمونے کے اندر ردعمل کو قابل بناتا ہے۔اور 18 انفرادی کنٹرول، معیاری پولیمریز چین ری ایکشن فلوروسینس کی شدت کے ساتھ اچھے معاہدے میں (پیئرسن کے کوفیشینٹس> 0.9)۔اس ٹکنالوجی کی بنیاد پر، ہم پولیمریز چین ری ایکشن سسٹم کی ترقی کی بھی وضاحت کرتے ہیں جو ریجنٹ انجیکشن، مکسنگ، اور رد عمل کے افعال کو ضم کرتا ہے تاکہ 18 نمونہ ناک کے مریض کے نمونوں سے تمام طبی ناک کے نمونوں کا تجزیہ کیا جا سکے۔ معیاری پولیمریز چین ری ایکشن کے ساتھ (پیئرسن کا گتانک> 0.9)۔مجوزہ پلیٹ فارم بایومیڈیکل تجزیہ کے قابل اعتماد آٹومیشن کی ضمانت دیتا ہے اور اس طرح کئی پوائنٹ آف کیئر ٹیسٹنگ آلات کی کمرشلائزیشن کو تیز کر سکتا ہے۔
ابھرتی ہوئی انسانی بیماریاں، جیسے کہ 2020 کی COVID-19 وبائی بیماری جس نے لاکھوں لوگوں کی جانیں لی ہیں، عالمی صحت اور انسانی تہذیب کے لیے سنگین خطرہ ہیں۔وائرس کے پھیلاؤ کو کنٹرول کرنے اور علاج کے نتائج کو بہتر بنانے کے لیے بیماریوں کا جلد اور تیز رفتار پتہ لگانا بہت ضروری ہے۔سنٹرلائزڈ لیبز پر مبنی ایک بنیادی تشخیصی ماحولیاتی نظام جہاں ٹیسٹ کے نمونے ہسپتالوں یا تشخیصی کلینکس کو بھیجے جاتے ہیں اور پیشہ ور افراد کے ذریعے چلائے جاتے ہیں، اس وقت دنیا بھر میں تقریباً 5.8 بلین لوگوں تک رسائی کو محدود کر رہا ہے، خاص طور پر وہ لوگ جو وسائل کی محدود ترتیبات میں رہتے ہیں۔جہاں مہنگے بائیو میڈیکل آلات اور مستند ماہرین کی کمی ہے۔کلینشین 2. اس طرح، پوائنٹ آف کیئر ٹیسٹنگ (POCT) کی صلاحیت کے ساتھ ایک سستا اور صارف دوست لیب آن اے چپ سسٹم تیار کرنے کی اشد ضرورت ہے جو معالجین کو تشخیص کے باخبر فیصلے کرنے کے لیے بروقت تشخیصی معلومات فراہم کر سکے۔ .اور علاج 3۔
ورلڈ ہیلتھ آرگنائزیشن (ڈبلیو ایچ او) کے رہنما خطوط میں کہا گیا ہے کہ ایک مثالی POCT سستی، صارف دوست (کم سے کم تربیت کے ساتھ استعمال میں آسان)، درست (جھوٹی منفی یا غلط مثبت چیزوں سے پرہیز)، تیز اور قابل اعتماد (اچھی تکرار کی خصوصیات فراہم کرنا)، اور ڈیلیور ایبل (طویل مدتی اسٹوریج کے قابل اور آخری صارفین کے لیے آسانی سے دستیاب) 4۔ان تقاضوں کو پورا کرنے کے لیے، POCT سسٹمز کو درج ذیل خصوصیات فراہم کرنا ہوں گی: دستی مداخلت کو کم کرنے کے لیے ورسٹائل خوراک، درست ٹیسٹ کے نتائج کے لیے ریجنٹ ٹرانسپورٹ کو پیمانے کے لیے آن ڈیمانڈ ریلیز، اور ماحولیاتی کمپن کو برداشت کرنے کے لیے قابل اعتماد کارکردگی۔فی الحال، سب سے زیادہ استعمال ہونے والا POCT ڈیوائس لیٹرل فلو سٹرپ 5,6 ہے جو غیر محفوظ نائٹروسیلوز جھلیوں کی کئی تہوں پر مشتمل ہے جو کہ کیپلیری فورس کے ذریعے پہلے سے متحرک ریجنٹس کے ساتھ رد عمل ظاہر کرتے ہوئے، نمونے کی بہت کم مقدار کو آگے بڑھاتی ہے۔اگرچہ ان میں کم قیمت، استعمال میں آسانی، اور تیز نتائج کا فائدہ ہے، بہاؤ کی پٹی پر مبنی POCT آلات صرف حیاتیاتی ٹیسٹوں کے لیے استعمال کیے جا سکتے ہیں (مثال کے طور پر، گلوکوز ٹیسٹ 7,8 اور حمل کے ٹیسٹ9,10) بغیر ملٹی اسٹیج کے تجزیوں کی ضرورت کے۔رد عمل (مثلاً متعدد ری ایجنٹس کی لوڈنگ، مکسنگ، ملٹی پلیکسنگ)۔اس کے علاوہ، ڈرائیونگ قوتیں جو سیال کی نقل و حرکت کو کنٹرول کرتی ہیں (یعنی، کیپلیری فورسز) اچھی مستقل مزاجی فراہم نہیں کرتی ہیں، خاص طور پر بیچوں کے درمیان، جس کے نتیجے میں تولیدی صلاحیت 11 خراب ہوتی ہے اور لیٹرل فلو بینڈز بنیادی طور پر اچھی شناخت 12,13 کے لیے مفید ہوتے ہیں۔
مائیکرو- اور نانوسکل میں توسیع شدہ مینوفیکچرنگ صلاحیتوں نے 14,15,16,17 مقداری پیمائش کے لیے مائیکرو فلائیڈک POCT آلات کی ترقی کے مواقع پیدا کیے ہیں۔انٹرفیس 18، 19 کی خصوصیات اور چینلز 20، 21، 22 کی جیومیٹری کو ایڈجسٹ کرکے، ان آلات کی کیپلیری فورس اور بہاؤ کی شرح کو کنٹرول کیا جا سکتا ہے۔تاہم، ان کی وشوسنییتا، خاص طور پر انتہائی گیلے مائعات کے لیے، مینوفیکچرنگ کی غلطیاں، مادی نقائص، اور ماحولیاتی کمپن کی حساسیت کی وجہ سے ناقابل قبول ہے۔اس کے علاوہ، چونکہ مائع-گیس کے انٹرفیس پر ایک کیپلیری بہاؤ پیدا ہوتا ہے، اس لیے کوئی اضافی بہاؤ متعارف نہیں کرایا جا سکتا، خاص طور پر مائکرو فلائیڈک چینل کو مائع سے بھرنے کے بعد۔لہذا، زیادہ پیچیدہ پتہ لگانے کے لئے، نمونہ انجکشن کے کئی مراحل کو انجام دینا ضروری ہے 24,25.
مائیکرو فلائیڈک ڈیوائسز میں، سینٹرفیوگل مائیکرو فلائیڈک ڈیوائسز فی الحال POCT26,27 کے لیے بہترین حل میں سے ایک ہیں۔اس کا ڈرائیو میکانزم فائدہ مند ہے کہ گھومنے والی رفتار کو ایڈجسٹ کرکے ڈرائیونگ فورس کو کنٹرول کیا جاسکتا ہے۔تاہم، نقصان یہ ہے کہ سینٹرفیوگل فورس کا رخ ہمیشہ ڈیوائس کے بیرونی کنارے کی طرف ہوتا ہے، جس سے زیادہ پیچیدہ تجزیوں کے لیے درکار ملٹی سٹیپ ری ایکشنز کو نافذ کرنا مشکل ہو جاتا ہے۔اگرچہ اضافی محرک قوتیں (مثلاً کیپلریز 28، 29 اور بہت سی دیگر 30، 31، 32، 33، 34، 35) سینٹرفیوگل فورس کے علاوہ ملٹی فنکشنل ڈوزنگ کے لیے متعارف کرائی گئی ہیں، لیکن غیر متوقع مائع کی منتقلی اب بھی ہو سکتی ہے کیونکہ یہ اضافی قوتیں عام طور پر حکم دیتی ہیں۔ سینٹرفیوگل فورس سے کم شدت کی، جو انہیں صرف چھوٹے آپریٹنگ رینجز پر موثر بناتی ہے یا مائع ریلیز کے ساتھ مانگ پر دستیاب نہیں ہوتی ہے۔نیومیٹک ہیرا پھیری کو سینٹری فیوگل مائیکرو فلائیڈکس میں شامل کرنا جیسے سینٹری فیوگل کائنےٹک طریقے 36، 37، 38، تھرمو نیومیٹک طریقے 39 اور فعال نیومیٹک طریقے 40 ایک پرکشش متبادل ثابت ہوا ہے۔کاؤنٹر فیوگوڈینامک اپروچ کے ساتھ، ایک اضافی گہا اور کنیکٹنگ مائیکرو چینلز کو بیرونی اور اندرونی دونوں کارروائیوں کے لیے ڈیوائس میں ضم کیا جاتا ہے، حالانکہ اس کی پمپنگ کی کارکردگی (75% سے 90% کی حد میں) پمپنگ سائیکلوں کی تعداد اور viscosity پر بہت زیادہ انحصار کرتی ہے۔ مائع کی.تھرمو نیومیٹک طریقہ میں، لیٹیکس جھلی اور سیال کی منتقلی کے چیمبر کو خاص طور پر ان لیٹ کو سیل کرنے یا دوبارہ کھولنے کے لیے ڈیزائن کیا گیا ہے جب پھنسے ہوئے ہوا کے حجم کو گرم یا ٹھنڈا کیا جاتا ہے۔تاہم، ہیٹنگ/کولنگ سیٹ اپ سست ردعمل کے مسائل کو متعارف کراتے ہیں اور تھرموسینسیٹیو اسسیس (مثلاً، پولیمریز چین ری ایکشن (PCR) ایمپلیفیکیشن) میں اس کے استعمال کو محدود کرتے ہیں۔ایک فعال نیومیٹک اپروچ کے ساتھ، آن ڈیمانڈ ریلیز اور باطنی حرکت مثبت دباؤ کے بیک وقت استعمال اور تیز رفتار موٹروں کے ذریعے درست طریقے سے مماثل گردشی رفتار کے ذریعے حاصل کی جاتی ہے۔صرف نیومیٹک ایکچیوٹرز (مثبت دباؤ 41، 42 یا منفی دباؤ 43) اور عام طور پر بند والو ڈیزائن کا استعمال کرتے ہوئے دیگر کامیاب طریقے ہیں۔نیومیٹک چیمبر میں لگاتار دباؤ ڈالنے سے، مائع کو پرسٹالٹک طور پر آگے بڑھایا جاتا ہے، اور عام طور پر بند والو peristalsis کی وجہ سے مائع کے بیک فلو کو روکتا ہے، اس طرح پیچیدہ مائع آپریشن کا احساس ہوتا ہے۔تاہم، فی الحال صرف ایک محدود تعداد میں مائیکرو فلائیڈک ٹیکنالوجیز ہیں جو ایک واحد POCT ڈیوائس میں پیچیدہ مائع آپریشن انجام دے سکتی ہیں، بشمول ملٹی فنکشنل ڈسپنسنگ، آن ڈیمانڈ ریلیز، قابل اعتماد کارکردگی، طویل مدتی اسٹوریج، ہائی وسکوسیٹی مائعات کی ہینڈلنگ، اور سرمایہ کاری مؤثر مینوفیکچرنگ.سب ایک ہی وقت میں۔ملٹی سٹیپ فنکشنل آپریشن کی کمی بھی اس کی ایک وجہ ہو سکتی ہے کیوں کہ آج تک صرف چند کمرشل پی او سی ٹی پراڈکٹس جیسے سیفائیڈ، بنکس، ویزبی، کوباس لیٹ، اور رونڈا کو کامیابی کے ساتھ اوپن مارکیٹ میں متعارف کرایا گیا ہے۔
اس مقالے میں، ہم گرین رنگ مائیکرو سوئچ ٹیکنالوجی (FAST) پر مبنی نیومیٹک مائیکرو فلائیڈک ایکچوایٹر تجویز کرتے ہیں۔FAST مائیکرو لیٹرز سے ملی لیٹر تک ری ایجنٹس کی ایک وسیع رینج کے لیے ایک ہی وقت میں تمام ضروری خصوصیات کو یکجا کرتا ہے۔فاسٹ لچکدار جھلیوں، لیورز اور بلاکس پر مشتمل ہوتا ہے۔ہوا کے دباؤ کے استعمال کے بغیر، جھلیوں، لیورز اور بلاکس کو مضبوطی سے بند کیا جا سکتا ہے اور اندر موجود مائع کو طویل عرصے تک ذخیرہ کیا جا سکتا ہے۔جب مناسب دباؤ لگایا جاتا ہے اور لیور کی لمبائی میں ایڈجسٹ کیا جاتا ہے تو، ڈایافرام پھیلتا ہے اور لیور کو کھلی جگہ پر دھکیل دیتا ہے، جس سے سیال گزر سکتا ہے۔یہ ایک جھرن، بیک وقت، ترتیب وار یا انتخابی انداز میں مائعات کی کثیر فعلی پیمائش کی اجازت دیتا ہے۔
ہم نے FAST کا استعمال کرتے ہوئے ایک PCR سسٹم تیار کیا ہے تاکہ انفلوئنزا A اور B وائرسز (IAV اور IBV) کا پتہ لگانے کے لیے نمونے میں جوابی نتائج پیدا کیے جا سکیں۔ہم نے 102 کاپیاں/mL کی کھوج کی کم حد (LOD) حاصل کی، ہمارے ملٹی پلیکس پرکھ نے IAV اور IBV کے لیے مخصوصیت ظاہر کی اور انفلوئنزا وائرس پیتھو ٹائپنگ کی اجازت دی۔18 مریضوں اور 18 صحت مند افراد سے ناک کے جھاڑو کے نمونے کا استعمال کرتے ہوئے طبی جانچ کے نتائج معیاری RT-PCR (پیئرسن کوفیشینٹس> 0.9) کے ساتھ فلوروسینس کی شدت میں اچھی ہم آہنگی ظاہر کرتے ہیں۔18 مریضوں اور 18 صحت مند افراد سے ناک کے جھاڑو کے نمونے کا استعمال کرتے ہوئے طبی جانچ کے نتائج معیاری RT-PCR (پیئرسن کوفیشینٹس> 0.9) کے ساتھ فلوروسینس کی شدت میں اچھی ہم آہنگی ظاہر کرتے ہیں۔Результаты клинических испытаний с использованием образца мазка из носа от 18 пациентов и 18 здоровых лица показованием нсивности флуоресценции стандартной ОТ-ПЦР (коэффициенты Пирсона > 0,9)۔18 مریضوں اور 18 صحت مند افراد سے ناک کے جھاڑو کے نمونے کا استعمال کرتے ہوئے کلینیکل ٹرائلز کے نتائج معیاری RT-PCR (پیئرسن کے کوفیشینٹس> 0.9) کی فلوروسینس شدت کے درمیان اچھے معاہدے کو ظاہر کرتے ہیں۔0.9) ....... Результаты клинических испытаний с использованием образцов назальных мазков от 18 пациентов и 18 здоровых лицавечевка ду интенсивностью флуоресценции и стандартной ОТ-ПЦР (коэфициент Пирсона > 0,9)۔18 مریضوں اور 18 صحت مند افراد سے ناک کے جھاڑو کے نمونوں کا استعمال کرتے ہوئے کلینیکل ٹرائلز کے نتائج نے فلوروسینس کی شدت اور معیاری RT-PCR (پیئرسن کا گتانک> 0.9) کے درمیان اچھا معاہدہ ظاہر کیا۔FAST-POCT ڈیوائس کی تخمینی مادی لاگت تقریباً US$1 ہے (ضمنی جدول 1) اور بڑے پیمانے پر مینوفیکچرنگ کے طریقوں (مثلاً انجیکشن مولڈنگ) کا استعمال کرکے اسے مزید کم کیا جا سکتا ہے۔درحقیقت، FAST پر مبنی POCT ڈیوائسز میں WHO کی طرف سے لازمی تمام ضروری خصوصیات موجود ہیں اور یہ نئے بائیو کیمیکل ٹیسٹنگ طریقوں جیسے پلازما تھرمل سائیکلنگ 44، ایمپلیفیکیشن فری امیونوساز 45 اور نینو باڈی فنکشنلائزیشن ٹیسٹ 46 کے ساتھ مطابقت رکھتی ہیں جو POCT سسٹم کی ریڑھ کی ہڈی ہیں۔امکان
انجیر پر۔1a FAST-POCT پلیٹ فارم کی ساخت کو ظاہر کرتا ہے، جو چار مائع چیمبروں پر مشتمل ہے: ایک پری اسٹوریج چیمبر، ایک مکسنگ چیمبر، ایک ری ایکشن چیمبر، اور ایک ویسٹ چیمبر۔فلو فلو کنٹرول کی کلید FAST ڈیزائن ہے (جس میں لچکدار جھلیوں، لیورز اور بلاکس پر مشتمل ہے) پری اسٹوریج چیمبر اور مکسنگ چیمبر میں واقع ہے۔ایک نیومیٹک طور پر عمل کرنے والے طریقہ کے طور پر، FAST ڈیزائن سیال کے بہاؤ کو درست کنٹرول فراہم کرتا ہے، بشمول بند/کھلی سوئچنگ، ورسٹائل ڈوزنگ، آن ڈیمانڈ فلویڈ ریلیز، قابل اعتماد آپریشن (مثلاً، ماحولیاتی کمپن کے لیے غیر حساسیت)، اور طویل مدتی اسٹوریج۔FAST-POCT پلیٹ فارم چار تہوں پر مشتمل ہے: ایک بیکنگ پرت، ایک لچکدار فلم کی تہہ، ایک پلاسٹک فلم کی تہہ، اور ایک کور کی تہہ، جیسا کہ تصویر 1b میں ایک وسیع منظر میں دکھایا گیا ہے (اضافی اعداد و شمار S1 اور S2 میں بھی تفصیل سے دکھایا گیا ہے۔ )۔تمام چینلز اور فلوئڈ ٹرانسپورٹ چیمبرز (جیسے پری اسٹوریج اور ری ایکشن چیمبرز) PLA (پولی لیکٹک ایسڈ) سبسٹریٹس میں 0.2 ملی میٹر (پتلا حصہ) سے لے کر 5 ملی میٹر موٹائی کے اندر جڑے ہوئے ہیں۔لچکدار فلمی مواد ایک 300 µm موٹا PDMS ہے جو اس کی "پتلی موٹائی" اور لچک کے کم ماڈیولس (تقریبا 2.25 MPa47) کی وجہ سے ہوا کا دباؤ لگانے پر آسانی سے پھیل جاتا ہے۔ہوا کے دباؤ کی وجہ سے لچکدار فلم کو ضرورت سے زیادہ خرابی سے بچانے کے لیے پولی تھیلین فلم کی تہہ 100 µm کی موٹائی کے ساتھ پولی تھیلین ٹیریفتھلیٹ (PET) سے بنی ہے۔چیمبروں کے مطابق، سبسٹریٹ پرت میں مائع کے بہاؤ کو کنٹرول کرنے کے لیے قلابے کے ذریعے کور کی پرت (PLA سے بنی) سے جڑے ہوئے لیور ہوتے ہیں۔لچکدار فلم کو دو طرفہ چپکنے والی ٹیپ (ARseal 90880) کا استعمال کرتے ہوئے بیکنگ پرت سے چپکایا گیا تھا اور اسے پلاسٹک کی فلم سے ڈھانپ دیا گیا تھا۔کور پرت میں ٹی کلپ ڈیزائن کا استعمال کرتے ہوئے سبسٹریٹ پر تین پرتیں جمع کی گئیں۔ٹی کلیمپ میں دو ٹانگوں کے درمیان فاصلہ ہوتا ہے۔جب کلپ کو نالی میں ڈالا گیا تو دونوں ٹانگیں قدرے جھک گئیں، پھر اپنی اصلی حالت میں واپس آگئیں اور نالی سے گزرتے ہوئے ڈھکن اور پشت کو مضبوطی سے باندھ دیا (ضمیمہ تصویر S1)۔چار تہوں کو پھر کنیکٹر کا استعمال کرتے ہوئے جمع کیا جاتا ہے۔
پلیٹ فارم کا اسکیمیٹک خاکہ FAST کے مختلف فنکشنل کمپارٹمنٹس اور خصوصیات کو ظاہر کرتا ہے۔b FAST-POCT پلیٹ فارم کا بڑھا ہوا خاکہ۔c امریکی ڈالر کے سکے کے ساتھ پلیٹ فارم کی تصویر۔
FAST-POCT پلیٹ فارم کا کام کرنے کا طریقہ کار تصویر 2 میں دکھایا گیا ہے۔ کلیدی اجزاء بنیادی پرت کے بلاکس اور کور کی تہہ پر قلابے ہیں، جس کے نتیجے میں جب چار تہوں کو T-شکل کا استعمال کرتے ہوئے اکٹھا کیا جاتا ہے تو ایک مداخلت کا ڈیزائن بنتا ہے۔ .جب کوئی ہوا کا دباؤ نہیں لگایا جاتا ہے (تصویر 2a)، مداخلت فٹ ہونے کی وجہ سے قبضہ موڑتا ہے اور بگڑ جاتا ہے، اور بلاک کے خلاف لچکدار فلم کو دبانے کے لیے لیور کے ذریعے سیلنگ فورس لگائی جاتی ہے، اور مہر کی گہا میں مائع کی وضاحت کی جاتی ہے۔ ایک مہربند ریاست کے طور پر.واضح رہے کہ اس حالت میں لیور باہر کی طرف جھکا ہوا ہے جیسا کہ تصویر 2a میں سائیڈ ویو میں دکھایا گیا ہے۔جب ہوا فراہم کی جاتی ہے (تصویر 2b)، لچکدار جھلی کور کی طرف باہر کی طرف پھیلتی ہے اور لیور کو اوپر کی طرف دھکیلتی ہے، اس طرح لیور اور بلاک کے درمیان ایک خلا کھل جاتا ہے تاکہ سیال کو اگلے چیمبر میں بہاؤ، جسے ایک کھلی حالت کے طور پر بیان کیا جاتا ہے۔ .ہوا کے دباؤ کے جاری ہونے کے بعد، لیور اپنی اصل پوزیشن پر واپس آ سکتا ہے اور قبضے کی لچک کی وجہ سے تنگ رہ سکتا ہے۔لیور کی نقل و حرکت کی ویڈیوز ضمنی فلم S1 میں پیش کی گئی ہیں۔
A. بند ہونے پر اسکیمیٹک ڈایاگرام اور تصاویر۔دباؤ کی غیر موجودگی میں، لیور بلاک کے خلاف جھلی کو دباتا ہے، اور مائع کو سیل کر دیا جاتا ہے.ب اچھی حالت میں۔جب دباؤ لگایا جاتا ہے، جھلی پھیلتی ہے اور لیور کو اوپر دھکیلتی ہے، اس طرح چینل کھل جاتا ہے اور سیال بہہ سکتا ہے۔c اہم دباؤ کے خصوصیت کے سائز کا تعین کریں۔خصوصیت کے طول و عرض میں لیور کی لمبائی (L)، سلائیڈر اور قبضے کے درمیان فاصلہ (l) اور لیور پروٹروژن (t) کی موٹائی شامل ہیں۔Fs تھروٹل پوائنٹ B پر کمپیکشن فورس ہے۔ q لیور پر یکساں طور پر تقسیم شدہ بوجھ ہے۔Tx* ہنگڈ لیور کے ذریعہ تیار کردہ ٹارک کی نمائندگی کرتا ہے۔نازک دباؤ وہ دباؤ ہے جو لیور کو بلند کرنے اور سیال کو بہانے کے لیے درکار ہوتا ہے۔اہم دباؤ اور عنصر کے سائز کے درمیان تعلق کے نظریاتی اور تجرباتی نتائج۔n = 6 آزاد تجربات کیے گئے اور ڈیٹا کو ± معیاری انحراف کے طور پر دکھایا گیا ہے۔خام ڈیٹا کو خام ڈیٹا فائلوں کے طور پر پیش کیا جاتا ہے۔
بیم تھیوری پر مبنی ایک تجزیاتی ماڈل تیار کیا گیا ہے تاکہ اس اہم دباؤ پی سی کے انحصار کا تجزیہ کیا جا سکے جس پر جیومیٹرک پیرامیٹرز پر گیپ کھلتا ہے (مثال کے طور پر، L لیور کی لمبائی ہے، l بلاک اور کے درمیان فاصلہ ہے۔ قبضہ، S لیور ہے مائع t کے ساتھ رابطے کا علاقہ لیور پروٹروژن کی موٹائی ہے، جیسا کہ تصویر 2c میں دکھایا گیا ہے)۔جیسا کہ سپلیمنٹری نوٹس اور سپلیمنٹری فگر S3 میں تفصیل سے بتایا گیا ہے، خلا اس وقت کھلتا ہے جب \({P}_{c}\ge \frac{2{F}_{s}l}{SL}\)، جہاں Fs ٹارک ہوتا ہے۔ \ ({T}_{x}^{\ast}(={F}_{s}l)\) مداخلت کے فٹ ہونے سے وابستہ قوتوں کو ختم کرنے کے لیے اور قبضہ کو موڑنے کا سبب بنتا ہے۔تجرباتی ردعمل اور تجزیاتی ماڈل اچھے معاہدے کو ظاہر کرتے ہیں (تصویر 2d)، یہ ظاہر کرتا ہے کہ اہم دباؤ پی سی میں t/l بڑھنے اور L گھٹنے کے ساتھ بڑھتا ہے، جس کی وضاحت کلاسیکی بیم ماڈل کے ذریعے آسانی سے کی جاتی ہے، یعنی t/Lift کے ساتھ ٹارک بڑھتا ہے۔ .اس طرح، ہمارا نظریاتی تجزیہ واضح طور پر ظاہر کرتا ہے کہ لیور کی لمبائی L اور t/l تناسب کو ایڈجسٹ کرکے اہم دباؤ کو مؤثر طریقے سے کنٹرول کیا جا سکتا ہے، جو FAST-POCT پلیٹ فارم کے ڈیزائن کے لیے ایک اہم بنیاد فراہم کرتا ہے۔
FAST-POCT پلیٹ فارم ملٹی فنکشنل ڈسپنسنگ فراہم کرتا ہے (ان سیٹ اور تجربے کے ساتھ شکل 3a میں دکھایا گیا ہے)، جو کامیاب POCT کی سب سے اہم خصوصیت ہے، جہاں سیال کسی بھی سمت اور کسی بھی ترتیب میں بہہ سکتے ہیں (جھرن، بیک وقت، ترتیب وار) یا سلیکٹیو ملٹی چینل۔ تقسیم- خوراک کی تقریب.انجیر پر۔3a(i) ایک کاسکیڈڈ ڈوزنگ موڈ دکھاتا ہے جس میں مختلف ری ایکٹنٹس کو الگ کرنے کے لیے بلاکس کا استعمال کرتے ہوئے دو یا دو سے زیادہ چیمبرز کاسکیڈ کیے جاتے ہیں اور کھلی اور بند حالتوں کو کنٹرول کرنے کے لیے ایک لیور۔جب دباؤ کا اطلاق ہوتا ہے تو، مائع جھرن کے انداز میں اوپر سے نیچے کے چیمبر کی طرف بہتا ہے۔واضح رہے کہ جھرنے والے چیمبر گیلے کیمیکلز یا خشک کیمیکل جیسے لائو فلائزڈ پاؤڈر سے بھرے جا سکتے ہیں۔تصویر 3a(i) کے تجربے میں، اوپری چیمبر سے سرخ سیاہی نیلے رنگ کے پاؤڈر (کاپر سلفیٹ) کے ساتھ دوسرے چیمبر میں بہتی ہے اور جب نچلے چیمبر تک پہنچتی ہے تو گہرا نیلا ہو جاتا ہے۔یہ پمپ کیے جانے والے سیال کے لیے کنٹرول پریشر کو بھی ظاہر کرتا ہے۔اسی طرح، جب ایک لیور دو چیمبروں سے منسلک ہوتا ہے، تو یہ بیک وقت انجیکشن موڈ بن جاتا ہے، جیسا کہ تصویر میں دکھایا گیا ہے۔3a(ii)، جس میں مائع کو یکساں طور پر دو یا زیادہ چیمبروں پر تقسیم کیا جا سکتا ہے جب دباؤ لگایا جاتا ہے۔چونکہ اہم دباؤ لیور کی لمبائی پر منحصر ہے، لیور کی لمبائی کو ترتیب وار انجیکشن پیٹرن حاصل کرنے کے لیے ایڈجسٹ کیا جا سکتا ہے جیسا کہ تصویر میں دکھایا گیا ہے۔3a(iii)۔ایک لمبا لیور (کریٹیکل پریشر Pc_long کے ساتھ) چیمبر B سے منسلک تھا اور ایک چھوٹا لیور (کریٹیکل پریشر Pc_short > Pc_long کے ساتھ) چیمبر A سے منسلک تھا۔ جیسے ہی پریشر P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) لگایا گیا تھا، صرف مائع سرخ رنگ میں تھا۔ چیمبر بی میں بہہ سکتا ہے اور جب دباؤ کو P2 (> Pc_short) تک بڑھایا جاتا ہے، تو نیلے رنگ کا مائع چیمبر A میں بہہ سکتا ہے۔ یہ ترتیب وار انجیکشن موڈ مختلف مائعات پر ان کے متعلقہ چیمبروں میں ترتیب سے منتقل ہوتا ہے، جو ایک کامیاب POCT کے لیے اہم ہے۔ آلہایک لمبا لیور (کریٹیکل پریشر Pc_long کے ساتھ) چیمبر B سے منسلک تھا اور ایک چھوٹا لیور (کریٹیکل پریشر Pc_short > Pc_long کے ساتھ) چیمبر A سے منسلک تھا۔ جیسے ہی پریشر P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) لگایا گیا تھا، صرف مائع سرخ رنگ میں تھا۔ چیمبر بی میں بہہ سکتا ہے اور جب دباؤ کو P2 (> Pc_short) تک بڑھایا جاتا ہے، تو نیلے رنگ کا مائع چیمبر A میں بہہ سکتا ہے۔ یہ ترتیب وار انجیکشن موڈ مختلف مائعات پر ان کے متعلقہ چیمبروں میں ترتیب سے منتقل ہوتا ہے، جو ایک کامیاب POCT کے لیے اہم ہے۔ آلہДлинный рычаг (с критическим давлением Pc_long) был соединен с камерой B, а короткий рычаг (с критическим давcлением Pc_long с камерой A. При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) только жидкость, выделенная красным может течь в CAMERU B, и когда давление было увеличено до P2 (> Pc_short), синяя жидкость может течь в камеру A я к различным жидкостям, последовательно перемещаемым в соответствующие камеры, что имеет решающее значение для последовательно перемещаемым.ایک لمبا لیور (کریٹیکل پریشر Pc_long کے ساتھ) چیمبر B سے منسلک تھا، اور ایک چھوٹا لیور (کریٹیکل پریشر Pc_short > Pc_long کے ساتھ) چیمبر A سے منسلک تھا۔ جب پریشر P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) لگایا جاتا ہے تو صرف مائع کو نمایاں کیا جاتا ہے۔ سرخ رنگ میں چیمبر B میں بہہ سکتا ہے، اور جب دباؤ کو P2 (> Pc_short) تک بڑھا دیا جاتا ہے، تو نیلے رنگ کا مائع چیمبر A میں بہہ سکتا ہے۔ یہ ترتیب وار انجکشن موڈ مختلف سیالوں پر لگایا جاتا ہے جو ترتیب وار متعلقہ چیمبروں کو منتقل کیا جاتا ہے، جو کہ اہم ہے۔ کامیاب POCT کے لیے۔آلہ Длинный рычаг (критическое давление Pc_long) соединен с камерой B, а короткий рычаг (критическое давление Pc_short) > Pc_long.لمبا بازو (کریٹیکل پریشر Pc_long) چیمبر B سے جڑا ہوا ہے اور چھوٹا بازو (کریٹیکل پریشر Pc_short > Pc_long) چیمبر A سے جڑا ہوا ہے۔При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) A может поступать синяя жидкость.جب دباؤ P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) لگایا جاتا ہے، تو صرف سرخ مائع چیمبر B میں داخل ہوسکتا ہے، اور جب دباؤ کو P2 (> Pc_short) تک بڑھایا جاتا ہے، تو نیلے رنگ کا مائع چیمبر A میں داخل ہوسکتا ہے۔ یہ ترتیب وار انجیکشن موڈ کی ترتیب وار منتقلی کے لیے موزوں ہے۔ متعلقہ چیمبروں میں مختلف سیال، جو POCT ڈیوائس کے کامیاب آپریشن کے لیے اہم ہے۔شکل 3a(iv) سلیکٹیو انجیکشن موڈ کو ظاہر کرتا ہے، جہاں مرکزی چیمبر میں ایک مختصر (تنقیدی دباؤ Pc_short کے ساتھ) اور ایک لمبا لیور (تنقیدی دباؤ Pc_long < Pc_short کے ساتھ) تھا جو بالترتیب چیمبر A اور چیمبر B سے جڑے ہوئے تھے، اس کے علاوہ۔ چیمبر B سے منسلک دوسرے ایئر چینل سے۔ مائع کو پہلے چیمبر A میں منتقل کرنے کے لیے، دباؤ P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) اور P2 (P2 > P1) P1 + P2 > Pc_short کے ساتھ ایک ہی وقت میں آلہ پر لاگو کیا گیا۔شکل 3a(iv) سلیکٹیو انجیکشن موڈ کو ظاہر کرتا ہے، جہاں مرکزی چیمبر میں ایک مختصر (تنقیدی دباؤ Pc_short کے ساتھ) اور ایک لمبا لیور (تنقیدی دباؤ Pc_long < Pc_short کے ساتھ) تھا جو بالترتیب چیمبر A اور چیمبر B سے جڑے ہوئے تھے، اس کے علاوہ۔ چیمبر B سے منسلک دوسرے ایئر چینل سے۔ مائع کو پہلے چیمبر A میں منتقل کرنے کے لیے، دباؤ P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) اور P2 (P2 > P1) P1 + P2 > Pc_short کے ساتھ ایک ہی وقت میں آلہ پر لاگو کیا گیا۔انجیر پر۔3 اے давлением Pc_long < Pc_short)، которые дополнительно соединялись с камерой A اور камерой B соответственно.3a(iv) سلیکٹیو انجیکشن موڈ دکھاتا ہے، جس میں مرکزی چیمبر میں ایک مختصر (اہم دباؤ Pc_short کے ساتھ) اور ایک لمبا لیور (تنقیدی دباؤ کے ساتھ Pc_long < Pc_short) تھا، جو بالترتیب چیمبر A اور چیمبر B سے منسلک تھے۔к другому воздушному каналу، соединенному с камерой B. Чтобы сначала передать жидкость в камеру A (Pc_long < P1 < Pc_short) اور P2 (P2 > P1)، где P1 + P2 > Pc_short۔چیمبر B سے منسلک ایک اور ایئر چینل سے۔ پہلے چیمبر A میں سیال منتقل کرنے کے لیے، P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) اور P2 (P2 > P1) بیک وقت ڈیوائس پر لاگو کیے گئے تھے، جہاں P1 + P2 > Pc_short۔ 3a (iv) показан режим селективного впрыска, когда основная камера имеет короткий стержень (с критическим давлением давлением давлением давлением) тическим давлением Pc_long < Pc_short)، соединеные с камерой A اور cameroy B соответственно، и в дополнение к другомудукаму. подключенному к комнате B.3a(iv) سلیکٹیو انجیکشن موڈ کو ظاہر کرتا ہے جب مین چیمبر میں ایک مختصر اسٹیم (کریٹیکل پریشر Pc_short) اور ایک لمبا اسٹیم (کریٹیکل پریشر Pc_long < Pc_short) بالترتیب چیمبر A اور چیمبر B سے منسلک ہوتا ہے، اور اس کے علاوہ ایک اور ہوا کا راستہ بھی، کمرے B سے منسلک.اس طرح، P2 مائع کو چیمبر B میں داخل ہونے سے روکتا ہے۔اس دوران، کل دباؤ P1 + P2 چیمبر A سے جڑے چھوٹے لیور کو چالو کرنے کے لیے اہم دباؤ سے تجاوز کر گیا تاکہ چیمبر A میں مائع کے بہاؤ کی اجازت دی جا سکے۔ پھر، جب چیمبر B کو بھرنے کی ضرورت تھی، ہمیں صرف P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) مین چیمبر میں لمبے لیور کو چالو کرنے اور مائع کو چیمبر B میں بہنے کی اجازت دیتا ہے۔ یہ وقت t = 3 s سے 9 s تک واضح طور پر دیکھا جا سکتا ہے کہ چیمبر A میں مائع مستقل رہتا ہے جبکہ یہ چیمبر میں بڑھتا ہے۔ B جب دباؤ P1 لاگو کیا گیا تھا۔اس دوران، کل دباؤ P1 + P2 چیمبر A سے جڑے چھوٹے لیور کو چالو کرنے کے لیے اہم دباؤ سے تجاوز کر گیا تاکہ چیمبر A میں مائع کے بہاؤ کی اجازت دی جا سکے۔ پھر، جب چیمبر B کو بھرنے کی ضرورت تھی، ہمیں صرف P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) مین چیمبر میں لمبے لیور کو چالو کرنے اور مائع کو چیمبر B میں بہنے کی اجازت دیتا ہے۔ یہ وقت t = 3 s سے 9 s تک واضح طور پر دیکھا جا سکتا ہے کہ چیمبر A میں مائع مستقل رہتا ہے جبکہ یہ چیمبر میں بڑھتا ہے۔ B جب دباؤ P1 لاگو کیا گیا تھا۔Между тем, общее давление P1 + P2 превысило критическое давление, чтобы активировать более короткий рычаг, сноевказмой рычаг лить жидкости течь в камеру A. Затем, когда требуется заполнить камеру B, нам нужно только применить P1 ) в основной камере, чтобы активировать длинный рычаг и дать жидкости течь в камеру B. Можно ясно наблюдать, tжод3 = дкость в камере ایک оставалась постоянной، в то время как в камере она увеличивалась.دریں اثنا، کل دباؤ P1 + P2 چیمبر A سے جڑے ایک چھوٹے لیور کو چالو کرنے کے لیے اہم دباؤ سے تجاوز کر گیا ہے تاکہ مائع کو چیمبر A میں بہنے دیا جائے۔ پھر جب چیمبر B کو بھرنے کی ضرورت ہو، ہمیں صرف P1 (Pc_long < P1) لگانے کی ضرورت ہے۔
ملٹی فنکشنل اسائنمنٹ کی مثال، یعنی (i) جھرن، (ii) بیک وقت، (iii) ترتیب وار، اور (iv) منتخب تفویض۔منحنی خطوط ان چار تقسیمی طریقوں کے ورک فلو اور پیرامیٹرز کی نمائندگی کرتے ہیں۔b deionized پانی اور ایتھنول میں طویل مدتی اسٹوریج ٹیسٹ کے نتائج۔n = 5 آزاد تجربات کیے گئے اور ڈیٹا کو ± sd c کے طور پر دکھایا گیا ہے۔استحکام ٹیسٹ کے مظاہرے جب FAST ڈیوائس اور کیپلیری والو (CV) ڈیوائس (i) جامد اور (ii) ہلنے والی حالتوں میں تھے۔(iii) FAST اور CV آلات کے لیے حجم بمقابلہ وقت مختلف کونیی فریکوئنسیوں پر۔d (i) فاسٹ ڈیوائس اور (ii) CV ڈیوائس کی مانگ پر ٹیسٹ کے نتائج کی اشاعت۔(iii) وقفے وقفے سے پریشر موڈ کا استعمال کرتے ہوئے FAST اور CV آلات کے حجم اور وقت کے درمیان تعلق۔تمام پیمانے کی سلاخیں، 1 سینٹی میٹر۔خام ڈیٹا کو خام ڈیٹا فائلوں کے طور پر فراہم کیا جاتا ہے۔
ریجنٹس کا طویل مدتی ذخیرہ ایک کامیاب POCT ڈیوائس کی ایک اور اہم خصوصیت ہے جو غیر تربیت یافتہ اہلکاروں کو متعدد ریجنٹس کو سنبھالنے کی اجازت دے گی۔جب کہ بہت سی ٹیکنالوجیز نے طویل مدتی ذخیرہ کرنے کی اپنی صلاحیت ظاہر کی ہے (مثال کے طور پر، 35 مائیکرو ڈسپنسر، 48 بلیسٹر پیک، اور 49 اسٹک پیک)، پیکیج کو ایڈجسٹ کرنے کے لیے ایک وقف وصول کرنے والے کمپارٹمنٹ کی ضرورت ہوتی ہے، جس سے لاگت اور پیچیدگی بڑھ جاتی ہے۔مزید برآں، یہ سٹوریج میکانزم آن ڈیمانڈ ڈسپنسنگ کی اجازت نہیں دیتے ہیں اور اس کے نتیجے میں پیکیجنگ میں بچا ہوا ری ایجنٹس کا ضیاع ہوتا ہے۔طویل مدتی ذخیرہ کرنے کی صلاحیت کی تصدیق CNC مشینی PMMA مواد کا استعمال کرتے ہوئے تیز رفتار زندگی ٹیسٹ کر کے اس کی معمولی کھردری اور گیس کے داخل ہونے کے خلاف مزاحمت کی وجہ سے کی گئی تھی (ضمنی اعداد و شمار S5)۔ٹیسٹ کا سامان 9 دن کے لیے 65 ° C پر deionized پانی (deionized water) اور 70% ایتھانول (simulating volatile reagents) سے بھرا ہوا تھا۔ڈیونائزڈ پانی اور ایتھنول دونوں کو ایلومینیم ورق کا استعمال کرتے ہوئے اوپر سے رسائی کو روکنے کے لیے ذخیرہ کیا گیا تھا۔لٹریچر 50,51 میں اطلاع دی گئی آرہینیئس مساوات اور دخول ایکٹیویشن انرجی کو ریئل ٹائم مساوی کا حساب لگانے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔انجیر پر۔3b 9 دن کے لیے 65°C پر ذخیرہ کیے گئے 5 نمونوں کے وزن میں کمی کے اوسط نتائج دکھاتا ہے، جو کہ 23°C پر 2 سال کے دوران ڈیونائزڈ پانی کے لیے 0.30% اور 70% ایتھنول کے لیے 0.72% کے برابر ہے۔
انجیر پر۔3c کمپن ٹیسٹ دکھاتا ہے۔چونکہ کیپلیری والو (CV) موجودہ POCT28,29 ڈیوائسز میں سیال ہینڈلنگ کا سب سے مقبول طریقہ ہے، اس لیے موازنہ کے لیے CV ڈیوائس 300 µm چوڑا اور 200 µm گہرا استعمال کیا گیا تھا۔یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ جب دونوں آلات ساکت رہتے ہیں، تو FAST-POCT پلیٹ فارم سیل میں موجود سیال اور CV ڈیوائس میں موجود سیال چینل کے اچانک پھیلنے کی وجہ سے بند ہو جاتا ہے، جس سے کیپلیری قوتیں کم ہو جاتی ہیں۔تاہم، جیسے جیسے مداری وائبریٹر کی کونیی فریکوئنسی بڑھتی ہے، FAST-POCT پلیٹ فارم میں سیال بند رہتا ہے، لیکن CV ڈیوائس میں موجود سیال نچلے چیمبر میں بہتا ہے (ضمنی مووی S3 بھی دیکھیں)۔اس سے پتہ چلتا ہے کہ FAST-POCT پلیٹ فارم کے خراب ہونے والے قلابے چیمبر میں مائع کو مضبوطی سے بند کرنے کے لیے ماڈیول پر ایک مضبوط مکینیکل قوت لگا سکتے ہیں۔تاہم، سی وی ڈیوائسز میں، ٹھوس، ہوا اور مائع کے مراحل کے درمیان توازن کی وجہ سے مائع کو برقرار رکھا جاتا ہے، جس سے عدم استحکام پیدا ہوتا ہے، اور کمپن توازن کو بگاڑ سکتی ہے اور غیر متوقع بہاؤ کے رویے کا سبب بن سکتی ہے۔FAST-POCT پلیٹ فارم کا فائدہ یہ ہے کہ یہ قابل اعتماد فعالیت فراہم کرتا ہے اور کمپن کی موجودگی میں ناکامی سے بچتا ہے جو عام طور پر ترسیل اور آپریشن کے دوران ہوتی ہیں۔
FAST-POCT پلیٹ فارم کی ایک اور اہم خصوصیت اس کی آن ڈیمانڈ ریلیز ہے، جو مقداری تجزیہ کے لیے ایک اہم ضرورت ہے۔انجیر پر۔3d FAST-POCT پلیٹ فارم اور CV ڈیوائس کی آن ڈیمانڈ ریلیز کا موازنہ کرتا ہے۔انجیر سے۔3d(iii) ہم دیکھتے ہیں کہ فاسٹ ڈیوائس پریشر سگنل کا فوری جواب دیتی ہے۔جب FAST-POCT پلیٹ فارم پر دباؤ ڈالا گیا تو سیال بہہ گیا، جب دباؤ چھوڑا گیا تو بہاؤ فوراً رک گیا (تصویر 3d(i))۔اس عمل کی وضاحت قبضے کی فوری لچکدار واپسی سے کی جا سکتی ہے، جو لیور کو بلاک کے خلاف دباتا ہے، چیمبر کو بند کرتا ہے۔تاہم، سی وی ڈیوائس میں سیال بہنا جاری رہا، جس کے نتیجے میں دباؤ کے جاری ہونے کے بعد تقریباً 100 μl کا غیر متوقع سیال حجم نکلا (شکل 3d(ii) اور سپلیمنٹری مووی S4)۔اس کی وضاحت پہلے انجیکشن کے بعد سی وی کے مکمل گیلے ہونے پر کیپلیری پننگ اثر کے غائب ہونے سے کی جا سکتی ہے۔
POCT ایپلی کیشنز کے لیے ایک ہی ڈیوائس میں مختلف گیلے پن اور viscosity کے مائعات کو سنبھالنے کی صلاحیت ایک چیلنج بنی ہوئی ہے۔ناقص گیلا پن چینلز میں لیک یا دیگر غیر متوقع بہاؤ کے رویے کا باعث بن سکتا ہے، اور ذیلی آلات جیسے وورٹیکس مکسر، سینٹری فیوجز اور فلٹرز کو اکثر انتہائی چپچپا مائعات تیار کرنے کی ضرورت ہوتی ہے 52۔ہم نے اہم دباؤ اور سیال کی خصوصیات کے درمیان تعلق کا تجربہ کیا (وٹی ایبلٹی اور واسکاسیٹی کی وسیع رینج کے ساتھ)۔نتائج جدول 1 اور ویڈیو S5 میں دکھائے گئے ہیں۔یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ مختلف گیلے پن اور چپکنے والی مائعات کو چیمبر میں بند کیا جا سکتا ہے، اور جب دباؤ لگایا جاتا ہے، تو 5500 cP تک کی واسکاسیٹی والے مائعات کو بھی ملحقہ چیمبر میں منتقل کیا جا سکتا ہے، جس سے نمونوں کا پتہ لگانا ممکن ہو جاتا ہے۔ viscosity (یعنی تھوک، ایک بہت چپچپا نمونہ جو سانس کی بیماریوں کی تشخیص کے لیے استعمال ہوتا ہے)۔
مندرجہ بالا ملٹی فنکشنل ڈسپنسنگ ڈیوائسز کو ملا کر، فاسٹ پر مبنی POCT آلات کی ایک وسیع رینج تیار کی جا سکتی ہے۔ایک مثال شکل 1 میں دکھائی گئی ہے۔ پلانٹ میں ایک پری اسٹوریج چیمبر، ایک مکسنگ چیمبر، ایک ری ایکشن چیمبر اور ایک ویسٹ چیمبر ہوتا ہے۔ری ایجنٹس کو پری اسٹوریج چیمبر میں طویل عرصے تک ذخیرہ کیا جا سکتا ہے اور پھر مکسنگ چیمبر میں خارج کیا جا سکتا ہے۔صحیح دباؤ کے ساتھ، مخلوط ری ایکٹنٹس کو منتخب طور پر کچرے کے چیمبر یا رد عمل کے چیمبر میں منتقل کیا جا سکتا ہے۔
چونکہ PCR کا پتہ لگانا پیتھوجینز جیسے H1N1 اور COVID-19 کا پتہ لگانے کے لیے سونے کا معیار ہے اور اس میں متعدد رد عمل کے مراحل شامل ہیں، اس لیے ہم نے PCR کا پتہ لگانے کے لیے FAST-POCT پلیٹ فارم کو بطور ایپلیکیشن استعمال کیا۔انجیر پر۔4 FAST-POCT پلیٹ فارم کا استعمال کرتے ہوئے PCR جانچ کے عمل کو دکھاتا ہے۔سب سے پہلے، ایلوٹنگ ریجنٹ، میگنیٹک مائکروبیڈ ری ایجنٹ، واش سلوشن A، اور واش سلوشن W کو بالترتیب پری اسٹوریج چیمبرز E، M، W1 اور W2 میں پائپ کیا گیا تھا۔آر این اے جذب کے مراحل انجیر میں دکھائے گئے ہیں۔4a اور مندرجہ ذیل ہیں: (1) جب دباؤ P1 (=0.26 بار) لگایا جاتا ہے، نمونہ چیمبر M میں چلا جاتا ہے اور مکسنگ چیمبر میں خارج ہوتا ہے۔(2) ایئر پریشر P2 (= 0.12 بار) مکسنگ چیمبر کے نیچے سے منسلک پورٹ A کے ذریعے فراہم کیا جاتا ہے۔اگرچہ اختلاط کے متعدد طریقوں نے پی او سی ٹی پلیٹ فارمز پر مائعات کے اختلاط میں اپنی صلاحیت ظاہر کی ہے (مثلاً سرپینٹائن مکسنگ 53، رینڈم مکسنگ 54 اور بیچ مکسنگ 55)، ان کے اختلاط کی کارکردگی اور تاثیر اب بھی تسلی بخش نہیں ہے۔یہ ببل مکسنگ کا طریقہ اپناتا ہے، جس میں مائع میں بلبلے بنانے کے لیے مکسنگ چیمبر کے نچلے حصے میں ہوا داخل کی جاتی ہے، جس کے بعد طاقتور بنور سیکنڈوں میں مکمل اختلاط حاصل کر سکتا ہے۔ببل مکسنگ کے تجربات کیے گئے تھے اور نتائج کو ضمنی شکل S6 میں پیش کیا گیا ہے۔یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ جب 0.10 بار کا دباؤ لگایا جاتا ہے، مکمل اختلاط میں تقریباً 8 سیکنڈ لگتے ہیں۔دباؤ کو 0.20 بار تک بڑھا کر، مکمل اختلاط تقریباً 2 سیکنڈ میں حاصل ہو جاتا ہے۔اختلاط کی کارکردگی کا حساب لگانے کے طریقے طریقوں کے سیکشن میں پیش کیے گئے ہیں۔(3) موتیوں کو نکالنے کے لیے روبیڈیم مقناطیس کا استعمال کریں، پھر ری ایجنٹس کو ویسٹ چیمبر میں منتقل کرنے کے لیے P3 (= 0.17 بار) پورٹ P کے ذریعے دباؤ ڈالیں۔انجیر پر۔4b,c نمونے سے نجاست کو دور کرنے کے لیے دھونے کے اقدامات کو اس طرح دکھاتا ہے: (1) چیمبر W1 سے واشنگ سلوشن A کو پریشر مکسنگ چیمبر P1 میں خارج کیا جاتا ہے۔(2) پھر ببل مکسنگ کا عمل کریں۔(3) واشنگ سلوشن A کو فضلہ مائع چیمبر میں منتقل کیا جاتا ہے، اور مکسنگ چیمبر میں موجود مائکروبیڈز کو مقناطیس کے ذریعے باہر نکالا جاتا ہے۔W (تصویر 4c) کو دھونا A (تصویر 4b) کو دھونے کے مترادف تھا۔واضح رہے کہ ہر دھونے کا مرحلہ A اور W دو بار انجام دیا گیا تھا۔شکل 4d موتیوں سے آر این اے کو خارج کرنے کے لیے اخراج کے مراحل دکھاتا ہے۔اختلاط اور اختلاط کے تعارف کے مراحل وہی ہیں جو اوپر بیان کیے گئے RNA جذب اور دھونے کے مراحل ہیں۔چونکہ ایلیوشن ریجنٹس P3 اور P4 (=0.23 بار) کے دباؤ کے تحت PCR ری ایکشن چیمبر میں منتقل ہوتے ہیں، PCR ری ایکشن چیمبر کے بازو کو سیل کرنے کے لیے اہم دباؤ تک پہنچ جاتا ہے۔اسی طرح، P4 دباؤ فضلہ چیمبر میں گزرنے کو سیل کرنے میں بھی مدد کرتا ہے۔اس طرح ، ملٹی پلیکس پی سی آر رد عمل کو شروع کرنے کے لئے تمام ایلیوشن ری ایجنٹس کو چار پی سی آر رد عمل چیمبروں میں یکساں طور پر تقسیم کیا گیا تھا۔مندرجہ بالا طریقہ کار سپلیمنٹری مووی S6 میں پیش کیا گیا ہے۔
آر این اے جذب کے مرحلے میں، نمونہ انلیٹ M میں داخل کیا جاتا ہے اور پہلے سے ذخیرہ شدہ مالا کے محلول کے ساتھ مکسنگ چیمبر میں داخل کیا جاتا ہے۔دانے داروں کو مکس کرنے اور ہٹانے کے بعد، ریجنٹس کو کچرے کے چیمبر میں تقسیم کیا جاتا ہے۔b اور c دھونے کے مراحل، مکسنگ چیمبر میں پہلے سے ذخیرہ شدہ واش ریجنٹس کو متعارف کروائیں، اور موتیوں کو مکس کرنے اور ہٹانے کے بعد، ریجنٹس کو فضلہ مائع چیمبر میں منتقل کریں۔d Elution مرحلہ: elution reagents کو متعارف کرانے، مکسنگ اور bead extract کرنے کے بعد، ری ایجنٹس کو PCR ری ایکشن چیمبر میں منتقل کیا جاتا ہے۔منحنی خطوط مختلف مراحل کے ورک فلو اور متعلقہ پیرامیٹرز کو ظاہر کرتے ہیں۔دباؤ وہ دباؤ ہے جو انفرادی چیمبروں کے ذریعے ڈالا جاتا ہے۔حجم مکسنگ چیمبر میں مائع کا حجم ہے۔تمام اسکیل بارز 1 سینٹی میٹر ہیں۔خام ڈیٹا کو خام ڈیٹا فائلوں کے طور پر فراہم کیا جاتا ہے۔
پی سی آر ٹیسٹنگ کا طریقہ کار انجام دیا گیا اور سپلیمنٹری فگر S7 تھرمل پروفائلز پیش کرتا ہے جس میں 20 منٹ ریورس ٹرانسکرپشن ٹائم اور 60 منٹ تھرمل سائیکلنگ ٹائم (95 اور 60 ° C) شامل ہے، جس میں ایک تھرمل سائیکل 90 s (ضمنی مووی S7) ہے۔.FAST-POCT کو ایک تھرمل سائیکل (90 سیکنڈ) مکمل کرنے کے لیے روایتی RT-PCR (ایک تھرمل سائیکل کے لیے 180 سیکنڈ) کے مقابلے میں کم وقت درکار ہوتا ہے۔اس کی وضاحت اونچی سطح کے رقبے سے حجم کے تناسب اور مائیکرو پی سی آر ری ایکشن چیمبر کی کم تھرمل جڑتا سے کی جا سکتی ہے۔چیمبر کی سطح 96.6 mm2 ہے اور چیمبر کا حجم 25 mm3 ہے، جس سے سطح کا حجم کا تناسب تقریباً 3.86 بنتا ہے۔جیسا کہ سپلیمنٹری فگر S10 میں دیکھا گیا ہے، ہمارے پلیٹ فارم کے PCR ٹیسٹ ایریا میں پچھلے پینل پر ایک نالی ہے، جس سے PCR چیمبر کا نچلا حصہ 200 µm موٹا ہوتا ہے۔درجہ حرارت کنٹرولر کی حرارتی سطح کے ساتھ تھرمل طور پر کنڈکٹیو لچکدار پیڈ منسلک ہوتا ہے، جس سے ٹیسٹ باکس کے پچھلے حصے سے سخت رابطے کو یقینی بنایا جاتا ہے۔یہ پلیٹ فارم کی تھرمل جڑتا کو کم کرتا ہے اور ہیٹنگ/کولنگ کی کارکردگی کو بہتر بناتا ہے۔تھرمل سائیکلنگ کے دوران، پلیٹ فارم میں سرایت شدہ پیرافین پگھل جاتا ہے اور پی سی آر ری ایکشن چیمبر میں بہہ جاتا ہے، جو ری ایجنٹ کے بخارات اور ماحولیاتی آلودگی کو روکنے کے لیے سیلنٹ کے طور پر کام کرتا ہے (دیکھیں سپلیمنٹری مووی S8)۔
اوپر بیان کردہ تمام پی سی آر کا پتہ لگانے کے عمل اپنی مرضی کے مطابق بنائے گئے FAST-POCT آلے کا استعمال کرتے ہوئے مکمل طور پر خودکار تھے، جس میں ایک پروگرام شدہ پریشر کنٹرول یونٹ، ایک مقناطیسی نکالنے کا یونٹ، ایک درجہ حرارت کنٹرول یونٹ، اور ایک فلوروسینٹ سگنل کیپچر اور پروسیسنگ یونٹ شامل تھا۔قابل غور بات یہ ہے کہ ہم نے RNA تنہائی کے لیے FAST-POCT پلیٹ فارم کا استعمال کیا اور پھر مقابلے کے لیے FAST-POCT سسٹم اور ڈیسک ٹاپ PCR سسٹم کا استعمال کرتے ہوئے PCR کے رد عمل کے لیے نکالے گئے RNA نمونوں کا استعمال کیا۔نتائج تقریباً وہی تھے جیسا کہ ضمنی شکل S8 میں دکھایا گیا ہے۔آپریٹر ایک آسان کام انجام دیتا ہے: نمونہ کو M-چیمبر میں متعارف کراتا ہے اور پلیٹ فارم کو آلے میں داخل کرتا ہے۔مقداری ٹیسٹ کے نتائج تقریباً 82 منٹ میں دستیاب ہوتے ہیں۔FAST-POCT ٹولز کے بارے میں تفصیلی معلومات ضمنی شکل میں مل سکتی ہیں۔C9، C10 اور C11۔
انفلوئنزا اے (آئی اے وی)، بی (آئی بی وی)، سی (آئی سی وی) اور ڈی (آئی ڈی وی) وائرس کی وجہ سے ہونے والا انفلوئنزا ایک عام عالمی رجحان ہے۔ان میں سے، IAV اور IBV سب سے زیادہ سنگین کیسز اور موسمی وبا کے لیے ذمہ دار ہیں، جو دنیا کی 5-15% آبادی کو متاثر کرتے ہیں، جس سے 3-5 ملین شدید کیسز ہوتے ہیں اور سالانہ 290,000-650,000 اموات ہوتی ہیں۔سانس کی بیماریاں 56,57IAV اور IB کی ابتدائی تشخیص بیماری اور اس سے منسلک معاشی بوجھ کو کم کرنے کے لیے ضروری ہے۔دستیاب تشخیصی تکنیکوں میں، ریورس ٹرانسکرپٹیس پولیمریز چین ری ایکشن (RT-PCR) سب سے زیادہ حساس، مخصوص اور درست (>99%)58,59 سمجھا جاتا ہے۔دستیاب تشخیصی تکنیکوں میں، ریورس ٹرانسکرپٹیس پولیمریز چین ری ایکشن (RT-PCR) سب سے زیادہ حساس، مخصوص اور درست (>99%)58,59 سمجھا جاتا ہے۔Среди доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считаетевлеция чной и точной (> 99%)58,59۔دستیاب تشخیصی طریقوں میں سے، ریورس ٹرانسکرپٹیس پولیمریز چین ری ایکشن (RT-PCR) سب سے زیادہ حساس، مخصوص اور درست (> 99%)58,59 سمجھا جاتا ہے۔ Из доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считаетется видео й и точной (>99%)58,59۔دستیاب تشخیصی طریقوں میں سے، ریورس ٹرانسکرپٹیس پولیمریز چین ری ایکشن (RT-PCR) سب سے زیادہ حساس، مخصوص اور درست (>99%)58,59 سمجھا جاتا ہے۔تاہم، روایتی RT-PCR طریقوں کے لیے بار بار پائپنگ، مکسنگ، ڈسپنسنگ اور سیال کی منتقلی کی ضرورت ہوتی ہے، جس سے وسائل کی محدود ترتیبات میں پیشہ ور افراد کے ذریعے ان کے استعمال کو محدود کیا جاتا ہے۔یہاں، FAST-POCT پلیٹ فارم کو بالترتیب IAV اور IBV کے PCR کا پتہ لگانے کے لیے استعمال کیا گیا تھا، تاکہ ان کی کھوج کی کم حد (LOD) حاصل کی جا سکے۔اس کے علاوہ، IAV اور IBV کو انواع میں مختلف پیتھوٹائپس کے درمیان امتیاز کرنے کے لیے ملٹی پلیکس کیا گیا ہے، جو جینیاتی تجزیہ اور بیماری کا درست علاج کرنے کی صلاحیت کے لیے ایک امید افزا پلیٹ فارم مہیا کرتا ہے۔
انجیر پر۔5a نمونے کے طور پر 150 μl پیوریفائیڈ وائرل RNA کا استعمال کرتے ہوئے HAV PCR ٹیسٹنگ کے نتائج دکھاتا ہے۔انجیر پر۔5a(i) سے پتہ چلتا ہے کہ 106 کاپیاں/ml کی HAV ارتکاز پر، فلوروسینس کی شدت (ΔRn) 0.830 تک پہنچ سکتی ہے، اور جب ارتکاز کو 102 کاپیاں/ml تک کم کر دیا جاتا ہے، ΔRn پھر بھی 0.365 تک پہنچ سکتا ہے، جو اس سے زیادہ کے مساوی ہے۔ خالی منفی کنٹرول گروپ (0.002)، تقریباً 100 گنا زیادہ۔چھ آزاد تجربوں کی بنیاد پر کوانٹیفیکیشن کے لیے، IAV (تصویر 5a(ii))، R2 = 0.993، 102-106 کاپیاں/mL کے درمیان لاگ انسنٹریشن اور سائیکل تھریشولڈ (Ct) کے درمیان ایک لکیری انشانکن وکر تیار کیا گیا تھا۔نتائج روایتی RT-PCR طریقوں کے ساتھ اچھے موافق ہیں۔انجیر پر۔5a(iii) FAST-POCT پلیٹ فارم کے 40 چکروں کے بعد ٹیسٹ کے نتائج کی فلوروسینٹ تصاویر دکھاتا ہے۔ہم نے پایا کہ FAST-POCT پلیٹ فارم 102 کاپیاں/mL سے کم HAV کا پتہ لگا سکتا ہے۔تاہم، روایتی طریقہ میں 102 کاپیاں/mL پر Ct ویلیو نہیں ہے، جو اسے تقریباً 103 کاپیاں/mL کا LOD بناتا ہے۔ہم نے قیاس کیا کہ یہ بلبلے کے اختلاط کی اعلی کارکردگی کی وجہ سے ہوسکتا ہے۔پی سی آر ٹیسٹ کے تجربات پیوریفائیڈ آئی اے وی آر این اے پر مختلف مکسنگ طریقوں کا جائزہ لینے کے لیے کیے گئے، بشمول شیک مکسنگ (وہی مکسنگ کا طریقہ جو روایتی RT-PCR آپریشن میں ہوتا ہے)، شیشی مکسنگ (یہ طریقہ، 0.12 بار پر 3 s) اور کنٹرول گروپ کے طور پر کوئی اختلاط نہیں۔ ..نتائج ضمنی شکل S12 میں دیکھے جا سکتے ہیں۔یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ زیادہ RNA ارتکاز (106 کاپیاں/mL) پر، اختلاط کے مختلف طریقوں کی Ct قدریں تقریباً ایک جیسی ہوتی ہیں جو ببل مکسنگ کے لیے ہوتی ہیں۔جب RNA کا ارتکاز 102 کاپیاں/mL تک گر گیا، شیک مکس اور کنٹرولز کی کوئی Ct ویلیو نہیں تھی، جبکہ ببل مکس طریقہ نے پھر بھی 36.9 کی Ct ویلیو دی، جو 38 کی Ct حد سے نیچے تھی۔ نتائج ایک غالب اختلاط کی خصوصیت کو ظاہر کرتے ہیں۔ vesicles، جس کا دوسرے ادب میں بھی مظاہرہ کیا گیا ہے، جو یہ بھی بتا سکتا ہے کہ FAST-POCT پلیٹ فارم کی حساسیت روایتی RT-PCR سے تھوڑی زیادہ کیوں ہے۔انجیر پر۔5b 101 سے 106 کاپیاں/ml تک کے پیوریفائیڈ IBV RNA نمونوں کے PCR تجزیہ کے نتائج دکھاتا ہے۔نتائج IAV ٹیسٹ سے ملتے جلتے تھے، R2 = 0.994 اور LOD 102 کاپیاں/mL حاصل کرتے ہوئے۔
TE بفر کو منفی کنٹرول (NC) کے طور پر استعمال کرتے ہوئے 106 سے 101 کاپیاں/mL تک کے IAV ارتکاز کے ساتھ انفلوئنزا اے وائرس (IAV) کا PCR تجزیہ۔(i) ریئل ٹائم فلوروسینس وکر۔(ii) FAST اور روایتی جانچ کے طریقوں کے لیے logarithmic IAV RNA ارتکاز اور سائیکل کی حد (Ct) کے درمیان لکیری کیلیبریشن وکر۔(iii) 40 سائیکلوں کے بعد IAV FAST-POCT فلوروسینٹ امیج۔b، (i) ریئل ٹائم فلوروسینس سپیکٹرم کے ساتھ انفلوئنزا بی وائرس (IBV) کا PCR پتہ لگانا۔(ii) لکیری کیلیبریشن وکر اور (iii) 40 سائیکلوں کے بعد FAST-POCT IBV فلوروسینس امیج۔FAST-POCT پلیٹ فارم کا استعمال کرتے ہوئے IAV اور IBV کے لیے پتہ لگانے کی نچلی حد 102 کاپیاں/mL تھی، جو روایتی طریقوں (103 کاپیاں/mL) سے کم ہے۔c ملٹی پلیکس ٹیسٹ کے نتائج برائے IAV اور IBV۔GAPDH کو مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا اور TE بفر کو منفی کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا تاکہ ممکنہ آلودگی اور بیک گراؤنڈ ایمپلیفیکیشن کو روکا جا سکے۔نمونوں کی چار مختلف اقسام میں فرق کیا جا سکتا ہے: (1) GAPDH-صرف منفی نمونے ("IAV-/IBV-")؛(2) IAV اور GAPDH کے ساتھ IAV انفیکشن ("IAV+/IBV-")؛(3) IBV انفیکشن ("IAV-/IBV+") IBV اور GAPDH کے ساتھ؛(4) IAV/IBV انفیکشن ("IAV+/IBV+") IAV، IBV اور GAPDH کے ساتھ۔نقطے والی لائن دہلیز کی لکیر کی نمائندگی کرتی ہے۔n = 6 حیاتیاتی طور پر آزاد تجربات کیے گئے، ڈیٹا کو ± معیاری انحراف کے طور پر دکھایا گیا ہے۔خام ڈیٹا کو خام ڈیٹا فائلوں کے طور پر پیش کیا جاتا ہے۔
انجیر پر۔5c IAV/IBV کے ملٹی پلیکسنگ ٹیسٹ کے نتائج دکھاتا ہے۔یہاں، وائرس لائسیٹ کو پیوریفائیڈ آر این اے کی جگہ نمونے کے حل کے طور پر استعمال کیا گیا تھا، اور FAST-POCT پلیٹ فارم کے چار مختلف ری ایکشن چیمبرز میں IAV، IBV، GAPDH (مثبت کنٹرول) اور TE بفر (منفی کنٹرول) کے لیے چار پرائمر شامل کیے گئے تھے۔ممکنہ آلودگی اور پس منظر میں اضافہ کو روکنے کے لیے یہاں مثبت اور منفی کنٹرول استعمال کیے جاتے ہیں۔ٹیسٹوں کو چار گروپوں میں تقسیم کیا گیا تھا: (1) GAPDH-منفی نمونے ("IAV-/IBV-")؛(2) IAV سے متاثرہ ("IAV+/IBV-") بمقابلہ IAV اور GAPDH؛(3) IBV-۔متاثرہ ("IAV-") -/IBV+") IBV اور GAPDH؛(4) IAV/IBV ("IAV+/IBV+") IAV، IBV اور GAPDH کے ساتھ انفیکشن۔انجیر پر۔5c سے پتہ چلتا ہے کہ جب منفی نمونے لگائے گئے تھے، مثبت کنٹرول چیمبر کی فلوروسینس کی شدت ΔRn 0.860 تھی، اور IAV اور IBV کا ΔRn منفی کنٹرول (0.002) کی طرح تھا۔IAV+/IBV-، IAV-/IBV+ اور IAV+/IBV+ گروپس کے لیے، IAV/GAPDH، IBV/GAPDH اور IAV/IBV/GAPDH کیمروں نے بالترتیب نمایاں فلوروسینس کی شدت دکھائی، جبکہ دوسرے کیمروں نے بھی ایک پس منظر میں فلوروسینس کی شدت دکھائی۔ تھرمل سائیکلنگ کے بعد 40 کی سطح۔مندرجہ بالا ٹیسٹوں سے، FAST-POCT پلیٹ فارم نے نمایاں خصوصیت ظاہر کی اور ہمیں بیک وقت مختلف انفلوئنزا وائرسز کو پیتھوٹائپ کرنے کی اجازت دی۔
FAST-POCT کے طبی اطلاق کی توثیق کرنے کے لیے، ہم نے IB مریضوں (n=18) اور غیر IB کنٹرولز (n=18) (شکل 6a) سے 36 طبی نمونوں (ناک جھاڑو کے نمونوں) کا تجربہ کیا۔مریض کی معلومات ضمنی جدول 3 میں پیش کی گئی ہیں۔ IB انفیکشن کی حیثیت کی آزادانہ طور پر تصدیق کی گئی تھی اور اسٹڈی پروٹوکول کو Zhejiang University First Affiliated Hospital (Hangzhou, Zhejiang) نے منظور کیا تھا۔مریضوں کے ہر نمونے کو دو قسموں میں تقسیم کیا گیا تھا۔ایک پر FAST-POCT کا استعمال کرتے ہوئے کارروائی کی گئی اور دوسرے پر ڈیسک ٹاپ PCR سسٹم (SLAN-96P، China) کا استعمال کرتے ہوئے کارروائی کی گئی۔دونوں اسیس ایک ہی پیوریفیکیشن اور ڈیٹیکشن کٹس استعمال کرتے ہیں۔انجیر پر۔6b FAST-POCT اور روایتی ریورس ٹرانسکرپشن PCR (RT-PCR) کے نتائج دکھاتا ہے۔ہم نے فلوروسینس کی شدت (FAST-POCT) کا موازنہ -log2(Ct) سے کیا، جہاں Ct روایتی RT-PCR کے لیے سائیکل کی حد ہے۔دونوں طریقوں کے درمیان اچھا معاہدہ تھا۔FAST-POCT اور RT-PCR نے پیئرسن کے تناسب (r) کی قدر 0.90 (شکل 6b) کے ساتھ ایک مضبوط مثبت تعلق ظاہر کیا۔اس کے بعد ہم نے FAST-POCT کی تشخیصی درستگی کا اندازہ کیا۔مثبت اور منفی نمونوں کے لیے فلوروسینس کی شدت (FL) کی تقسیم ایک آزاد تجزیاتی پیمائش (تصویر 6c) کے طور پر فراہم کی گئی تھی۔FL کی قدریں IB کے مریضوں میں کنٹرولز کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ تھیں (****P = 3.31 × 10-19؛ دو دم والا t-ٹیسٹ) (تصویر 6d)۔اگلا، IBV ریسیور آپریٹنگ خصوصیات (ROC) منحنی خطوط کی منصوبہ بندی کی گئی تھی۔ہم نے پایا کہ تشخیصی درستگی بہت اچھی تھی، جس کا رقبہ 1 (تصویر 6e) کے نیچے ہے۔براہ کرم نوٹ کریں کہ 2020 تک COVID-19 کی وجہ سے چین میں لازمی ماسک آرڈر کرنے کی وجہ سے، ہم نے IBD والے مریضوں کی شناخت نہیں کی ہے، اس لیے تمام مثبت طبی نمونے (یعنی ناک کے جھاڑو کے نمونے) صرف IBV کے لیے تھے۔
کلینیکل اسٹڈی ڈیزائن۔FAST-POCT پلیٹ فارم اور روایتی RT-PCR کا استعمال کرتے ہوئے کل 36 نمونوں کا تجزیہ کیا گیا، جن میں 18 مریضوں کے نمونے اور 18 غیر انفلوئنزا کنٹرول شامل ہیں۔b FAST-POCT PCR اور روایتی RT-PCR کے درمیان تجزیاتی مستقل مزاجی کا اندازہ لگائیں۔نتائج مثبت طور پر منسلک تھے (پیئرسن r = 0.90)۔c 18 IB مریضوں اور 18 کنٹرولز میں فلوروسینس کی شدت کی سطح۔d IB کے مریضوں میں (+)، FL کی قدریں کنٹرول گروپ (-) (****P = 3.31 × 10-19؛ دو دم والے t-ٹیسٹ؛ n = 36) کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ تھیں۔ہر مربع پلاٹ کے لیے، بیچ میں بلیک مارکر میڈین کی نمائندگی کرتا ہے، اور باکس کے نیچے اور اوپر کی لکیریں بالترتیب 25ویں اور 75ویں پرسنٹائلز کی نمائندگی کرتی ہیں۔سرگوشیاں کم سے کم اور زیادہ سے زیادہ ڈیٹا پوائنٹس تک پھیلی ہوئی ہیں، جنہیں آؤٹ لیئر نہیں سمجھا جاتا ہے۔e ROC وکر۔ڈاٹڈ لائن d ROC تجزیہ سے تخمینہ شدہ حد کی قیمت کی نمائندگی کرتی ہے۔IBV کے لیے AUC 1 ہے۔ خام ڈیٹا خام ڈیٹا فائلوں کے طور پر فراہم کیا جاتا ہے۔
اس مضمون میں، ہم FAST پیش کرتے ہیں، جس میں ایک مثالی POCT کے لیے ضروری خصوصیات ہیں۔ہماری ٹیکنالوجی کے فوائد میں شامل ہیں: (1) ورسٹائل ڈوزنگ (کیسکیڈ، بیک وقت، ترتیب وار اور سلیکٹیو)، ڈیمانڈ پر ریلیز (لاگو پریشر کی تیز اور متناسب ریلیز) اور قابل اعتماد آپریشن (150 ڈگری پر کمپن) (2) طویل مدتی اسٹوریج (تیز رفتار جانچ کے 2 سال، وزن میں تقریباً 0.3 فیصد کمی)؛(3) گیلے پن اور واسکاسیٹی کی وسیع رینج کے ساتھ مائعات کے ساتھ کام کرنے کی صلاحیت (5500 سی پی تک واسکعثٹی)؛(4) اقتصادی (FAST-POCT PCR ڈیوائس کی مادی لاگت تقریباً US$1 ہے)۔ملٹی فنکشنل ڈسپنسر کو ملا کر، انفلوئنزا A اور B وائرسز کی PCR کا پتہ لگانے کے لیے ایک مربوط FAST-POCT پلیٹ فارم کا مظاہرہ اور اطلاق کیا گیا۔FAST-POCT میں صرف 82 منٹ لگتے ہیں۔36 ناک جھاڑو کے نمونوں کے ساتھ کلینیکل ٹیسٹوں نے معیاری RT-PCR (پیئرسن کوفیشینٹس> 0.9) کے ساتھ فلوروسینس کی شدت میں اچھی ہم آہنگی ظاہر کی۔36 ناک جھاڑو کے نمونوں کے ساتھ کلینیکل ٹیسٹوں نے معیاری RT-PCR (پیئرسن کوفیشینٹس> 0.9) کے ساتھ فلوروسینس کی شدت میں اچھی ہم آہنگی ظاہر کی۔Клинические тесты с 36 образцами мазков из носа показали хорошее соответствие интенсивности Плуоресценции Плуоресценции стан irsona > 0,9)۔ناک کی جھاڑیوں کے 36 نمونوں کے ساتھ کلینیکل ٹیسٹوں نے معیاری RT-PCR (Pearson's coefficients> 0.9) کی فلوروسینس شدت کے ساتھ اچھا معاہدہ ظاہر کیا۔RT-PCR Клинические испытания 36 образцов мазков из носа показали хорошее совпадение интенсивности флуоресценции со-станоресценции irsona > 0,9)۔36 ناک کے جھاڑو کے نمونوں کی کلینیکل جانچ نے معیاری RT-PCR (پیئرسن کا گتانک> 0.9) کے ساتھ فلوروسینس کی شدت کا اچھا معاہدہ ظاہر کیا۔اس کام کے متوازی طور پر، مختلف ابھرتے ہوئے بائیو کیمیکل طریقوں (مثال کے طور پر، پلازما تھرمل سائیکلنگ، ایمپلیفیکیشن فری امیونواسیز، اور نینو باڈی فنکشنلائزیشن اسیس) نے پی او سی ٹی میں اپنی صلاحیت ظاہر کی ہے۔تاہم، مکمل طور پر مربوط اور مضبوط POCT پلیٹ فارم کی کمی کی وجہ سے، ان طریقوں کے لیے لازمی طور پر الگ الگ پری پروسیسنگ طریقہ کار کی ضرورت ہوتی ہے (مثال کے طور پر، RNA isolation44، incubation45 اور washing46)، جو کہ ان طریقوں کے ساتھ موجودہ کام کو مزید مکمل کرتا ہے تاکہ جدید POCT افعال کو لاگو کیا جا سکے۔ مطلوبہ پیرامیٹرزفیچ ان ریسپانس آؤٹ پٹ کارکردگی۔اس کام میں، اگرچہ FAST والو کو چالو کرنے کے لیے استعمال ہونے والا ایئر پمپ اتنا چھوٹا ہے کہ اسے بینچ ٹاپ انسٹرومنٹ (تصویر S9, S10) میں ضم کیا جا سکتا ہے، لیکن یہ اب بھی کافی طاقت استعمال کرتا ہے اور شور پیدا کرتا ہے۔اصولی طور پر، چھوٹے فارم فیکٹر نیومیٹک پمپ کو دوسرے ذرائع سے تبدیل کیا جا سکتا ہے، جیسے کہ برقی مقناطیسی قوت یا انگلیوں کے عمل کا استعمال۔مزید بہتریوں میں شامل ہو سکتے ہیں، مثال کے طور پر، مختلف اور مخصوص بائیو کیمیکل اسیسز کے لیے کٹس کو اپنانا، پتہ لگانے کے نئے طریقوں کا استعمال کرتے ہوئے جن کے لیے ہیٹنگ/کولنگ سسٹم کی ضرورت نہیں ہے، اس طرح PCR ایپلی کیشنز کے لیے ٹول فری POCT پلیٹ فارم مہیا کرنا۔ہمارا ماننا ہے کہ FAST پلیٹ فارم مائعات میں ہیرا پھیری کا ایک طریقہ فراہم کرتا ہے، ہم سمجھتے ہیں کہ مجوزہ FAST ٹیکنالوجی نہ صرف بایومیڈیکل ٹیسٹنگ کے لیے بلکہ ماحولیاتی نگرانی، خوراک کے معیار کی جانچ، مواد اور منشیات کی ترکیب کے لیے بھی ایک مشترکہ پلیٹ فارم بنانے کی صلاحیت کو پیش کرتی ہے۔ ..
انسانی ناک کے جھاڑو کے نمونوں کو جمع کرنے اور استعمال کرنے کی منظوری Zhejiang University First Affiliated Hospital (IIT20220330B) کی اخلاقیات کمیٹی نے دی ہے۔ناک کے جھاڑو کے 36 نمونے اکٹھے کیے گئے، جن میں 16 بالغ <30 سال، 7 بالغ> 40 سال کی عمر کے، اور 19 مرد، 17 خواتین شامل تھیں۔ناک کے جھاڑو کے 36 نمونے اکٹھے کیے گئے، جن میں 16 بالغ <30 سال، 7 بالغ> 40 سال کی عمر کے، اور 19 مرد، 17 خواتین شامل تھیں۔Было собрано 36 образцов мазков из носа, в которых приняли участие 16 взрослых < 30 лет, 7 взрослых старще , 40 ж19ж7ул.ناک کی جھاڑو کے چھتیس نمونے 16 بالغوں سے<30 سال سے کم عمر کے، 40 سال سے زیادہ عمر کے 7 بالغوں، 19 مرد اور 17 خواتین سے لیے گئے۔.آبادیاتی ڈیٹا کو ضمنی جدول 3 میں پیش کیا گیا ہے۔ تمام شرکاء سے باخبر رضامندی حاصل کی گئی تھی۔تمام شرکاء کو انفلوئنزا ہونے کا شبہ تھا اور بغیر معاوضے کے رضاکارانہ طور پر ان کا تجربہ کیا گیا۔
فاسٹ بیس اور ڈھکن پولی لیکٹک ایسڈ (PLA) سے بنے ہیں اور Ender 3 Pro 3D پرنٹر (Shenzhen Transcend 3D Technology Co., Ltd.) کے ذریعے پرنٹ کیے گئے ہیں۔ڈبل سائیڈڈ ٹیپ Adhesives Research, Inc. ماڈل 90880 سے خریدی گئی تھی۔ 100 µm موٹی PET فلم McMaster-Carr سے خریدی گئی تھی۔چپکنے والی اور PET فلم دونوں کو Silhouette America, Inc کے Silhouette Cameo 2 کٹر کا استعمال کرتے ہوئے کاٹا گیا تھا۔ لچکدار فلم انجیکشن مولڈنگ کے ذریعے PDMS مواد سے بنی ہے۔سب سے پہلے، ایک 200 µm موٹا PET فریم ایک لیزر سسٹم کا استعمال کرتے ہوئے کاٹا گیا اور 100 µm ڈبل رخا چپکنے والی ٹیپ کا استعمال کرتے ہوئے 3 ملی میٹر موٹی PMMA شیٹ سے چپکا گیا۔PDMS کا پیش خیمہ (Sylgard 184؛ Part A: Part B = 10:1، Dow Corning) پھر سانچے میں ڈالا گیا اور اضافی PDMS کو ہٹانے کے لیے شیشے کی چھڑی کا استعمال کیا گیا۔70° C. پر 3 گھنٹے تک علاج کرنے کے بعد، 300 μm موٹی PDMS فلم کو سانچے سے چھلکا جا سکتا ہے۔
ورسٹائل ڈسٹری بیوشن، آن ڈیمانڈ پبلشنگ اور قابل اعتماد کارکردگی کے لیے تصاویر تیز رفتار کیمرے (Sony AX700 1000 fps) کے ساتھ لی جاتی ہیں۔قابل اعتماد ٹیسٹ میں استعمال ہونے والا مداری شیکر SCILOGEX (SCI-O180) سے خریدا گیا تھا۔ہوا کا دباؤ ایک ایئر کمپریسر کے ذریعے پیدا ہوتا ہے، اور دباؤ کی قدر کو ایڈجسٹ کرنے کے لیے کئی ڈیجیٹل پریسجن پریشر ریگولیٹرز استعمال کیے جاتے ہیں۔بہاؤ کے رویے کی جانچ کا عمل درج ذیل ہے۔ٹیسٹ ڈیوائس میں سیال کی ایک پہلے سے طے شدہ مقدار داخل کی گئی تھی اور بہاؤ کے رویے کو ریکارڈ کرنے کے لیے ایک تیز رفتار کیمرہ استعمال کیا گیا تھا۔پھر بھی تصاویر مقررہ اوقات میں بہاؤ کے رویے کی ویڈیوز سے لی گئیں، اور بقیہ علاقے کا شمار امیج پرو پلس سافٹ ویئر کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا، جس کے بعد حجم کا حساب لگانے کے لیے کیمرے کی گہرائی سے ضرب کی گئی۔بہاؤ کے رویے کی جانچ کے نظام کی تفصیلات ضمنی شکل S4 میں مل سکتی ہیں۔
شیشی مکسنگ ڈیوائس میں 50 µl مائکروبیڈز اور 100 µl ڈیونائزڈ پانی ڈالیں۔0.1 بار، 0.15 بار اور 0.2 بار کے دباؤ پر ہر 0.1 سیکنڈ میں تیز رفتار کیمرے سے مخلوط کارکردگی کی تصاویر لی گئیں۔بلینڈنگ کے عمل کے دوران پکسل کی معلومات فوٹو پروسیسنگ سافٹ ویئر (فوٹو شاپ CS6) کا استعمال کرتے ہوئے ان تصاویر سے حاصل کی جا سکتی ہیں۔اور اختلاط کی کارکردگی درج ذیل مساوات 53 کے ساتھ حاصل کی جا سکتی ہے۔
جہاں M اختلاط کی کارکردگی ہے، N نمونے کے پکسلز کی کل تعداد ہے، اور ci اور \(\bar{c}\) نارملائزڈ اور متوقع نارملائزڈ ارتکاز ہیں۔اختلاط کی کارکردگی 0 (0%، غیر مکس) سے 1 (100%، مکمل طور پر مخلوط) تک ہوتی ہے۔نتائج ضمنی شکل S6 میں دکھائے گئے ہیں۔
IAV اور IBV کے لیے ریئل ٹائم RT-PCR کٹ، بشمول IAV اور IBV RNA نمونے (cat. no. RR-0051-02/RR-0052-02, Liferiver, China), Tris-EDTA بفر (TE بفر نمبر B541019) , Sangon Biotech, China), مثبت کنٹرول RNA Purification Kit (Part No. Z-ME-0010, Liferiver, China) اور GAPDH Solution (Part No. M591101, Sangon Biotech, China) تجارتی طور پر دستیاب ہیں۔آر این اے پیوریفیکیشن کٹ میں بائنڈنگ بفر، واش اے، واش ڈبلیو، ایلیونٹ، میگنیٹک مائکروبیڈز، اور ایکریلک کیریئر شامل ہیں۔IAV اور IBV ریئل ٹائم RT-PCR کٹس میں IFVA نیوکلک ایسڈ PCR کا پتہ لگانے کا مکس اور RT-PCR انزائم شامل ہیں۔بائنڈنگ بفر سلوشن کے 500 μl میں 6 µl AcrylCarrier اور 20 µl مقناطیسی موتیوں کو شامل کریں، اچھی طرح ہلائیں اور پھر مالا کا محلول تیار کریں۔واشس A اور W میں 21 ملی لیٹر ایتھنول شامل کریں، بالترتیب A اور W کا حل حاصل کرنے کے لیے اچھی طرح ہلائیں۔اس کے بعد، IFVA نیوکلک ایسڈ کے ساتھ 18 µl فلوروسینٹ پی سی آر مکسچر اور 1 µl RT-PCR انزائم کو 1 µl TE محلول میں شامل کیا گیا، 20 µl IAV اور IBV پرائمر حاصل کرتے ہوئے، کئی سیکنڈ تک ہلایا اور سینٹری فیوج کیا گیا۔
درج ذیل آر این اے صاف کرنے کے طریقہ کار پر عمل کریں: (1) آر این اے جذب۔526 µl گولی کے محلول کو 1.5 ملی لیٹر سینٹری فیوج ٹیوب میں ڈالیں اور 150 µl نمونہ ڈالیں، پھر دستی طور پر ٹیوب کو 10 بار اوپر اور نیچے ہلائیں۔مکسچر کا 676 µl افینیٹی کالم میں منتقل کریں اور 60 سیکنڈ کے لیے 1.88 x 104 g پر سینٹری فیوج کریں۔اس کے بعد آنے والے نالوں کو ضائع کر دیا جاتا ہے۔(2) دھونے کا پہلا مرحلہ۔افینیٹی کالم میں 500 μl واش محلول A شامل کریں، 40 سیکنڈ کے لیے 1.88 x 104 g پر سینٹری فیوج کریں، اور خرچ شدہ محلول کو ضائع کریں۔دھونے کا یہ عمل دو بار دہرایا گیا۔(3) دھونے کا دوسرا مرحلہ۔افینیٹی کالم میں 500 μl واش محلول W شامل کریں، 15 سیکنڈ کے لیے 1.88×104 g پر سینٹری فیوج کریں اور خرچ شدہ محلول کو ضائع کریں۔دھونے کا یہ عمل دو بار دہرایا گیا۔(4) Elutionایفینیٹی کالم میں 200 µl ایلیویٹ شامل کریں اور 2 منٹ کے لیے 1.88 x 104 g پر سینٹری فیوج کریں۔(5) RT-PCR: ایلویٹ کو پی سی آر ٹیوب میں پرائمر محلول کے 20 μl میں انجکشن کیا گیا تھا، پھر ٹیوب کو RT-PCR کے عمل کو انجام دینے کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ٹیسٹ اپریٹس (SLAN-96P) میں رکھا گیا تھا۔پتہ لگانے کے پورے عمل میں تقریباً 140 منٹ لگتے ہیں (20 منٹ RNA صاف کرنے کے لیے اور 120 منٹ PCR کا پتہ لگانے کے لیے)۔
526 µl مالا کا محلول، 1000 µl واش محلول A، 1000 µl واش محلول W، 200 µl ایلیویٹ اور 20 µl پرائمر محلول کو ابتدائی طور پر چیمبرز M, W1, W2, E اور PCR کا پتہ لگانے والے چیمبروں میں شامل اور ذخیرہ کیا گیا تھا۔پلیٹ فارم اسمبلی۔اس کے بعد، 150 µl نمونے کو چیمبر M میں پائپ کیا گیا تھا اور FAST-POCT پلیٹ فارم کو ضمنی اعداد و شمار S9 میں دکھائے گئے ٹیسٹ کے آلے میں داخل کیا گیا تھا۔تقریباً 82 منٹ کے بعد، ٹیسٹ کے نتائج دستیاب ہوئے۔
جب تک کہ دوسری صورت میں نوٹ نہ کیا جائے، تمام ٹیسٹ کے نتائج کو صرف FAST-POCT پلیٹ فارم اور حیاتیاتی طور پر آزاد نمونوں کا استعمال کرتے ہوئے کم از کم چھ نقل کے بعد اوسط ± SD کے طور پر پیش کیا جاتا ہے۔کسی بھی ڈیٹا کو تجزیہ سے خارج نہیں کیا گیا تھا۔تجربات بے ترتیب نہیں ہیں۔محققین تجربے کے دوران گروپ کے کاموں سے اندھے نہیں تھے۔
مطالعہ کے ڈیزائن کے بارے میں مزید معلومات کے لیے، اس مضمون سے منسلک نیچر ریسرچ رپورٹ کا خلاصہ دیکھیں۔
اس مطالعہ کے نتائج کی حمایت کرنے والا ڈیٹا ضمنی معلومات میں دستیاب ہے۔یہ مضمون اصل ڈیٹا فراہم کرتا ہے۔
Chagla, Z. & Madhukar, P. امیر ممالک میں COVID-19 کے فروغ دینے والے سب کے لیے ویکسین میں تاخیر کریں گے۔Chagla, Z. & Madhukar, P. امیر ممالک میں COVID-19 کے فروغ دینے والے سب کے لیے ویکسین میں تاخیر کریں گے۔Chagla, Z. اور Madhukar, P. امیر ممالک میں COVID-19 کے فروغ دینے والے ہر ایک کے لیے ویکسین میں تاخیر کریں گے۔Chagla, Z. اور Madhukar, P. امیر ممالک میں COVID-19 کی ویکسینیشن ہر کسی کے لیے ویکسینیشن میں تاخیر کرے گی۔قومی دوائی۔27، 1659–1665 (2021)۔
Faust، L. et al.کم اور درمیانی آمدنی والے ممالک میں SARS-CoV-2 ٹیسٹنگ: پرائیویٹ ہیلتھ کیئر سیکٹر میں دستیابی اور استطاعت۔مائکروبیل انفیکشن.22، 511–514 (2020)۔
ورلڈ ہیلتھ آرگنائزیشن.منتخب قابل علاج جنسی طور پر منتقل ہونے والے انفیکشن کے عالمی پھیلاؤ اور واقعات: ایک جائزہ اور تخمینہ۔جنیوا: WHO, WHO/HIV_AIDS/2 https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/66818/WHO_HIV_AIDS_2001.02.pdf (2001)۔
فینٹن، ای ایم وغیرہ۔متعدد 2D مولڈ سائیڈ فلو ٹیسٹ سٹرپس۔ASS درخواست۔الما میٹرانٹر میلان۔1، 124–129 (2009)۔
شلنگ، کے ایم وغیرہ۔مکمل طور پر منسلک مائکرو فلائیڈک کاغذ پر مبنی تجزیہ آلہ۔مقعدکیمیکل۔84، 1579–1585 (2012)۔
لیپینٹر، N. et al.مسابقتی کاغذ پر مبنی امیونوکرومیٹوگرافی کے ساتھ مل کر انزائم میں ترمیم شدہ الیکٹروڈ پیشاب کی کوٹینائن کی وائرلیس نگرانی اور الیکٹرو کیمیکل تعین کرنے کی اجازت دیتا ہے۔سینسر 21، 1659 (2021)۔
Zhu, X. et al.گلوکوومیٹر کا استعمال کرتے ہوئے ورسٹائل نانوزیم انٹیگریٹڈ لیٹرل فلوئڈ پلیٹ فارم کے ساتھ بیماری کے بائیو مارکر کی مقدار درست کرنا۔حیاتیاتی سینسر.بائیو الیکٹرانکس۔126، 690–696 (2019)۔
بو، ایس وغیرہ۔کونکانولین A-ہیومن کوریونک گوناڈوٹروپین-Cu3(PO4)2 ہائبرڈ نینو فلاورز، مقناطیسی علیحدگی اور سمارٹ فون ریڈنگ کا استعمال کرتے ہوئے پیتھوجینک بیکٹیریا کی شناخت کے لیے حمل ٹیسٹ کی پٹی۔مائیکرو کمپیوٹر۔میگزین.185، 464 (2018)۔